A imagem não invasiva acrescenta uma dimensão longitudinal aos estudos do fígado de primatas não humanos (NHP), mas as diferentes técnicas de ressonância magnética medem diferentes características biológicas. A fração de gordura com densidade de prótons derivada de ressonância magnética (MRI-PDFF) estima a fração de prótons móveis atribuíveis à gordura em relação ao sinal combinado de gordura e água. Quantifica a esteatose hepática; não mede colágeno oufibrosediretamente.Biópsia hepáticafornece tecido para avaliação histopatológica, incluindo estadiamento de fibrose, mas coleta amostras apenas de uma pequena parte do órgão.
Para uma questão de fibrose, a medida de imagem de interesse é aquela orientada para fibrose, como rigidez hepática derivada de MRE ou volume extracelular (ECV) derivado de ressonância magnética, lido junto com a biópsia. O PDFF complementa esses desfechos quando a esteatose faz parte do modelo ou da hipótese de tratamento.
Combine o método de imagem com o endpoint
MRI-PDFF é uma medida quantitativa da gordura hepática. É útil em tratamentos induzidos por dieta e outrosmodelos de fígado esteatóticoquando o estudo pergunta se a gordura hepática muda ao longo do tempo ou em resposta a uma intervenção. Uma alteração no PDFF significa uma alteração na fração de gordura medida. Por si só, não há evidência de que a fibrose tenha regredido ou progredido.
O MRE estima a rigidez do tecido a partir da propagação de ondas de cisalhamento induzidas mecanicamente. A rigidez hepática está associada à fibrose, mas a medição é indireta e outros fatores, incluindo inflamação, congestão, colestase, condições de aquisição e qualidade técnica, também a afetam. O ECV derivado de ressonância magnética é um parâmetro diferente, geralmente calculado a partir de medições T1 pré e pós-contraste com correção do hematócrito. Os dois métodos não são intercambiáveis.
A biópsia permite o exame direto do tecido amostrado. Dependendo do protocolo, a patologia relata estágio de fibrose, esteatose, inflamação, balonamento de hepatócitos, alterações nos ductos biliares e outras características. A histologia coleta amostras de uma pequena parte do órgão, não de todo o fígado, e o local da amostragem, a adequação da amostra, a coloração, o método de pontuação e a variabilidade do leitor afetam o resultado. Nos estudos de PNH, a repetição da amostragem também deve ser justificada tendo em conta o bem-estar dos animais, a carga processual e o valor científico da informação.
Os métodos diferem no que medem e como os resultados devem ser interpretados:
- RM-PDFFmede a fração de gordura do fígado. Quantifica a esteatose e sua alteração ao longo do tempo; não quantifica a fibrose diretamente.
- MREestima a rigidez do tecido derivada da onda de cisalhamento. Pode apoiar a avaliação não invasiva da fibrose quando validada, mas a rigidez é indireta e fatores não fibróticos também a afetam.
- RM-ECVestima a fração de volume extracelular com contraste. Seu uso para avaliação de fibrose é específico do protocolo e requer validação, e não é intercambiável com ERM.
- Biópsia com histologiacaracteriza características em amostra de tecido hepático, incluindo estágio de fibrose e lesão tecidual. A amostragem é limitada e a pontuação e a repetibilidade exigem controle.
O que os estudos do NHP mostram e o que não mostram
O trabalho publicado do NHP fornece exemplos de medições hepáticas baseadas em ressonância magnética combinadas com histologia, embora os métodos e modelos devam ser nomeados com precisão. Em um estudo prospectivo de 48macacos cynomolgus, o ECV hepático foi medido em animais com esteato-hepatite não alcoólica e comparado com o estadiamento histológico da fibrose. Esse estudo avaliou o ECV derivado de ressonância magnética; não é uma validação de ERM ou RM-PDFF para fibrose.[1]
Um relatório posterior estudou 104 macacos cynomolgus com fibrose precoce confirmada por biópsia (F1) e 10 controles saudáveis. Avaliou MRI-ECV juntamente com PDFF. Esse relatório vinculou o ECV à avaliação precoce da fibrose e o PDFF à quantificação da gordura; PDFF correlacionou-se com o componente de esteatose histológica do NAFLD Activity Score (NAS). Os resultados apoiam o uso das duas medidas de ressonância magnética para diferentes desfechos nessa coorte. Eles não estabelecem o PDFF como uma medida de fibrose e não definem limites transferíveis para outras espécies, modelos de doenças, scanners ou laboratórios.[2]
Os estudos em humanos ajudam a explicar a distinção pretendida entre as modalidades, mas não substituem a validação do PNH. Uma análise longitudinal em pacientes comNASH, por exemplo, avaliaram a rigidez da ressonância magnética contra a resposta à fibrose e a ressonância magnética-PDFF contra a resposta à esteatose, usando os achados da biópsia como comparador. Os autores descreveram os resultados como preliminares e solicitaram avaliações adicionais.[3] As estimativas de desempenho humano não são características operacionais estabelecidas do PNH.
A biópsia permanece informativa, mas não é uma referência de todo o fígado
Uma biópsia distingue características teciduais que a imagem não resolve e fornece um estágio de fibrose com base em um sistema de pontuação pré-especificado. Também ajuda a estabelecer se um modelo é caracterizado principalmente por esteatose, esteato-hepatite, lesão colestática ou outra patologia. Uma biópsia central, entretanto, representa uma pequena amostra de tecido. Uma amostra focal pode não refletir a distribuição das lesões no fígado, e a mudança aparente entre os pontos no tempo pode refletir parcialmente a amostragem ou a variação do leitor.
A terminologia de pontuação também é importante. Na estrutura de pontuação de atividade da DHGNA comumente usada, NAS é a soma não ponderada de esteatose, inflamação lobular e balonamento hepatocelular. A fibrose é avaliada separadamente no sistema de pontuação histológica mais amplo e não faz parte do NAS total.[4] Se a fibrose for o desfecho primário, o protocolo deve indicar o método de estadiamento da fibrose e relatá-lo separadamente do NAS.
Considerações sobre o desenho do estudo para avaliação seriada do NHP
A etiologia do modelo deve orientar opacote de imagens. Um modelo de esteatótica ou esteato-hepatite induzido por dieta justifica a medição do PDFF juntamente com um desfecho relacionado à fibrose. Um modelo de estenose ou ligadura do ducto biliar representa lesão colestática e não deve ser assumido como reproduzindo a esteato-hepatite metabólica. Em qualquer cenário, uma medida que funciona num modelo não funcionará necessariamente da mesma forma noutro.
Quando imagens e biópsia são usadas juntas, o protocolo deve definir o desfecho primário antes do início do estudo. Os detalhes relevantes incluem a espécie e o modelo, a sequência de imagens e o scanner, o tempo de aquisição, as condições de jejum e anestesia quando aplicável, regiões de interesse, critérios de qualidade de imagem, localização e tempo da biópsia, manchas histológicas, método de pontuação de fibrose, cegamento do leitor e o plano de análise. Se forem pretendidas medições repetidas, a repetibilidade dentro do animal e a faixa biológica esperada de mudança também são importantes.
A imagem pareada e a histologia caracterizam como uma medida de imagem se relaciona com os achados teciduais em um modelo específico. Essa relação deve ser avaliada com métodos pré-especificados e uma faixa adequada de gravidade da doença. A correlação por si só não estabelece que dois desfechos sejam intercambiáveis ou que uma alteração na imagem preveja uma alteração na fibrose relacionada ao tratamento.
Escolhendo endpoints por questão de pesquisa
Se a questão principal diz respeito à gordura hepática, o MRI-PDFF é um desfecho de imagem quantitativo apropriado, com a histologia ou outras medidas específicas do estudo fornecendo um contexto complementar. Se a questão principal diz respeito à fibrose, uma medida orientada para a fibrose, como MRE ou MRI-ECV, aplica-se apenas quando o protocolo e o modelo a apoiam; o estadiamento histológico da fibrose pode ser incluído como comparador de tecidos. Se o estudo envolver esteatose e fibrose, pré-especificar desfechos separados em vez de combiná-los em uma única interpretação.
Na pesquisa hepática do NHP, a escolha entre exames de imagem e biópsia depende da questão, e não de qual método geralmente é melhor. A imagem suporta medições repetidas e não invasivas em todo o fígado; a biópsia caracteriza o tecido amostrado. O valor de qualquer um dos métodos depende do desfecho biológico, do modelo da doença, da evidência de validação e do desenho do estudo. MRI-PDFF é uma medida de gordura hepática; as conclusões sobre fibrose precisam de evidências específicas para fibrose.
Referências
- Lyu L, Liu XL, Rui MP, et al.Os valores da fração do volume extracelular do fígado obtidos com ressonância magnética podem estadiar quantitativamente a fibrose hepática: um estudo de validação em macacos com esteatohepatite não alcoólica.Radiologia Europeia. 2020. doi:10.1007/s00330-020-06902-w. PMID: 32377814.
- Rui MP, Zhu XY, Lü L, Liu XL, Fan D, Zhu ZH, et al.[Valor diagnóstico de MRI-ECV combinado com imagens de MRI-PDFF para fibrose hepática precoce em um modelo de macaco cynomolgus NAFLD]. Jornal Chinês de TC e RM. 2024;(5):120–122. Registro de diário. (Artigo em chinês.)
- Jayakumar S, Middleton MS, Lawitz EJ, et al.Correlações longitudinais entre MRE, MRI-PDFF e histologia hepática em pacientes com esteatohepatite não alcoólica: análise de dados de um ensaio de fase II de selonsertib.Jornal de Hepatologia. 2019. doi:10.1016/j.jhep.2018.09.024. PMID: 30291868.
- Kleiner DE, Brunt EM, Van Natta M, et al.Desenho e validação de um sistema de pontuação histológica para doença hepática gordurosa não alcoólica.Hepatologia. 2005;41(6):1313–1321. doi:10.1002/hep.20701. PMID: 15915461.
